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青蛤(Cyclina sinensis)亲环素A基因的克隆与鳗弧菌刺激后的表达分析

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青蛤(Cyclina sinensis)是我国沿海常见的经济贝类.为推动国内青蛤养殖产业的可持续健康发展，开展对青蛤免疫抗病害机制方面的研究显得尤为重要．采用SMART-cDNA文库和高通量测序方法,筛选出青蛤亲环素A基因(CypA)的全长cDNA.采用荧光定量PCR法分析该基因在鳗弧茵刺激后的表达情况,并对青蛤CypA基因进行原核表达与蛋白纯化.结果表明,青蛤CypA基因全长共962bp,其中5’UTR为87bp,37UTR为346bp,开放阅读框长度为495bp,可以编码164个氨基酸,理论相对分子质量约为19.39kDa,等电点约为5.25.在菌液侵染刺激条件下,刺激3h后表达量即达到峰值,随后表达量逐渐降为正常水平.本研究成功表达了重组CypA蛋白,并运用镍离子交换柱法分离纯化出该蛋白,其相对分子质量约为19kDa.

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来源
《中国动物学会北方七省市区动物学学术研讨会》|2015年|80-8395|共5页
会议地点天津
作者
ZHANG Haijing; 张海静; WEI Xing; 魏星; PAN Baoping; 潘宝平;
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作者单位

中国动物学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S944.47;
关键词
青蛤养殖; 抗病害机制; 亲环素A基因; 鳗弧茵刺激; 基因表达;

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