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利用SELEX技术筛选获得结核患者血清IgG抗体适体

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目的：利用SELEX技术筛选获得结核患者血清IgG抗体的特异性适体。rn 方法：体外合成长度为78个核苷酸的随机ssDNA文库，利用SELEX技术筛选，以结核患者血清中的IgG抗体为靶标进行筛选;筛选得到的饱和ssDNA适体文库，经克隆测序获得单个适体，生物素-亲和素显色系统检测适体与靶标的亲和性，DNAMAN软件分析适体的二级构象，血清学检测进行适体特异性的鉴定。rn 结果：纯化获得的IgG抗体浓度为1.3mg/mL。SELEX筛选10轮后，随机挑选13个适体进行亲和性检测和二级结构分析。结果显示，亲和性吸光度值大于1.0的适体有5个。二级构象分析揭示，适体与靶分子的结合基础为口袋颈环鼓包结构和分枝的连接角度。对亲和性吸光度值大于1.0的5个适体，经29份临床标本检测进行特异性的进一步验证显示，其中有4个适体对结核病组与健康对照组的检测结果具有显著差异。rn 结论：初步筛选获得结核患者血清IgG抗体的适体，并有较高的特异性。

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来源
《二O一一年中国防痨协会全国学术会议》|2011年|282-284|共3页
会议地点桂林
作者
秦莲花; 柏文娟; 胡忠义; 刘忠华; 杨华;
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作者单位

中国防痨协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类结核病;免疫学检验;
关键词
结核病; IgG抗体; SELEX技术; 特异性适体; 显色系统;

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