中缅树鼩微卫星分子标记的筛选

摘要

目的:筛选中缅树鼩微卫星分子标记,逐步填补中缅树鼩缺乏特异性遗传标记的空白。方法:建立中缅树鼩基因小片段插入文库,利用5’端地高辛标记的(AC)15探针从约1500个菌落中选出36个阳性克隆。对这些克隆进行测序,发现其中15个含有重复序列,其中1个为重复克隆,1个因两端序列太短而不能设计引物。结果:用Primer3软件设计13对引物。PCR结果,13对均有条带。退火温度分布在44℃到52℃之间。阳性克隆率为2.4%,微卫星克隆率为1%。结论:利用地高辛标记探针筛选树鼩微卫星分子标记所得的微卫星克隆率,可达到传统放射性同位素标记探针同等的效果,并可避免放射性危害。树鼩微卫星分子标记的筛选将为下一步进行基因组结构的分析、树鼩遗传连锁图谱的构建、分子进化和标记辅助选择等提供大量的微卫星标记。

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