首页> 中文会议>中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛 >福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆及其体外功能表达

福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆及其体外功能表达

页面导航

摘要
著录项
相似文献
相关主题

摘要

[目的]克隆福寿螺多功能纤维素酶基因egx,并在大肠杆菌和哺乳动物细胞中进行表达分析。[方法]通过RT-PCR的方法,从福寿螺胃组织total RNA中克隆福寿螺多功能纤维素酶egx基因序列,连接到克隆载体Pmd18-T,再通过EcoRⅠ和NotⅠ两个酶切位点分别与表达载体Pet-32a,(+)及pcDNA3.1(+)连接,构建原核、真核表达载体,并在Ecoli BL-21(DE3)和猪肾细胞PK15中进行表达,最后采用DNS法测定表达产物酶学活性。[结果]测序结果表明,RT-PCR扩增得到1326 bp的序列,包括1185 bp的编码序列和部分侧翼序列,编码序列与已报道的福寿螺多功能纤维素酶基因Cdna序列相似性为99%,氨基酸序列相似性为100%。原核细胞表达产物经包涵体复性后,对羧甲基纤维素钠、2-羟乙基纤维素、羟乙基纤维素、微晶纤维素、木聚糖的水解活性分别为:24.78U/mg、15.67U/mg、18.42U/mg、600.91U/mg、175.43U/mg;而在PK15细胞中重组酶对以上五种底物的活性分别为:0.84U/Ml、0.78U/Ml、1.01U/Ml、14.62U/Ml、4.23U/Ml。[结论]克隆了福寿螺多功能纤维素酶基因,并成功在大肠杆菌和哺乳动物细胞中表达,为福寿螺多功能纤维素酶的深入研究及广泛应用奠定了基础。

著录项

来源
《中国畜牧兽医学会养猪学分会第五次全国会员代表大会暨养猪业创新发展论坛》|2010年|306-313|共8页
会议地点桂林
作者
黄妙容; 刘德武; 吴珍芳;
展开▼
作者单位

中国畜牧兽医学会;

展开▼
会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类基因的表达;
关键词
福寿螺; 多功能纤维素酶; 原核表达; 真核表达; 酶活测定;

相似文献

中文文献
外文文献
专利

1. 福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆及其体外功能性表达 [J] . 黄妙容 ,刘德武 ,吴珍芳 . 中国农业科学 . 2011,第017期
2. 多功能纤维素酶(EGXA)基因在福寿螺胃、肠和肝脏表达水平的测定 [J] . 程天印 ,李姣 . 中国农学通报 . 2013,第35期
3. 基于毛木耳CDS的福寿螺多功能纤维素酶基因密码子优化分析 [J] . 贾定洪 ,王波 ,李小林 . 西南农业学报 . 2017,第008期
4. 福寿螺多功能纤维素酶EGXA在酿酒酵母中的表达 [J] . 高中华 ,许根俊 ,赵辅昆 . 浙江理工大学学报 . 2007,第004期
5. 福寿螺多功能纤维素酶(EGXA)的结构功能研究 [J] . 赵颖 ,丁明 ,高如丽 . 浙江理工大学学报 . 2008,第005期
6. 福寿螺(Ampullaria crossean)多功能纤维素酶EGX的研究 [C] . 赵辅昆 ,王骥 ,丁明 . 第四届中国酶工程学术交流讨论会 . 2003
7. 福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆与功能研究 [A] . 谷嵩 . 2007

福寿螺多功能纤维素酶基因egx的克隆及其体外功能表达

摘要

著录项

相似文献

相关主题

期刊订阅