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变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒TaqMan荧光定量RT-PCR方法的建立与初步应用

摘要

参照GenBank的变异型猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)与普通PRRSV的NSP2段基因序列,设计并合成了引物和TaqMan探针。通过对反应条件优化,标准质粒品构建,建立了TaqMan荧光定量RT-PCR诊断变异犁PRRSV方法。结果表明,该方法具有特异性强,敏感性高等特点,能够检测出264个拷贝数的标准质粒品,0.5623 TICD50的病毒量,比RT-PCR敏感1O倍。对22份病料样品进行检测,结果有8份为阳性,阳性率为36.4%。由于该方法具有定量、快速、准确、敏感等优点,适用于对猪群感染变异型PRRSV早、中、晚期的诊断,对有效诊断及防治高致病性猪繁殖与呼吸综合征的发生起到重要作用。

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