家蚕dpp基因的克隆和表达研究

摘要

dpp基因是昆虫发育过程中的关键基因,在果蝇胚胎发育中,dpp基因参与胚胎背-腹轴的分化、体节的形成、并指导果蝇翅膀和复眼视网膜的形成。利用家蚕EST数据克隆了家蚕dpp基因Bmdpp,其克隆的mRNA 全长1437bp,ORF1146bp,编码381个氨基酸的蛋白,预测分子量为38.6kD,等电点为9.18。通过半定量RT-PCR对Bmdpp在家蚕各组织和各个发育时期的表达情况进行调查。结果表明Bmdpp基因在所检测的家蚕各组织均有表达;在对不同胚胎发育时期表达情况的调查发现,在受精6h-14h 表达量很低,甚至没有表达。这一表达模式和果蝇dpp基因在胚胎发育过程中的表达模式相似,推测Bmdpp在家蚕早期胚胎发育背-腹轴的分化中起作用。将Bmdpp基因完整CDS序列亚克隆到pET-28a(+)表达载体,转化,诱导。经SDS-PAGE电泳诱导菌检测到约40 kD 与预测分子量相符的目的蛋白带。

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