TSA(Tyramide signal amplification)信号放大技术自1989年诞生以来已经得到蓬勃发展，其应用范围包括荧光原位杂交(fluorescence in situ hybridization, FISH)、免疫组织染色(immunohistochemistry, IHC)等。TSA技术具有大幅提升检测灵敏度、减少探针使用量、避免使用放射性物质等优势。TSA-FISH (Tyramide signal amplification fluorescence in situ hybridization)是一种新颖的高灵敏度的荧光原位杂交技术，它的主要反应原理是辣根过氧化物酶(HRP)催化过氧化氢和标记的酪胺分子(tyramide)的苯环部分反应，使荧光标记的酪胺分子在直接带有或间接带有HRP报告分子的探针周围沉积，信号因此得以极大的放大，从而大大提高了荧光原位杂交技术的灵敏度。Schriml等(1999)比较过传统FISH与TSA-FISH之间的效果差异，在都使用长度小于lkb的探针情况下，TSA-FISH可以清楚显示目标基因在细胞分裂中期染色体中的位置，而传统FISH则完全无法检测到目标基因的信号。TSA可以提高FISH灵敏度2100倍，TSA-FISH还有操作简便、快速等优点，还可利用多色荧光素标记tyramide增加其容量。用HRP标记寡核普酸或用荧光素直接标记tyramide能提高其特异性。笔者已于2009年夏季在南海、东海的典型海区开展相关研究工作，目标是以TSA-FISH方法探寻中国海典型海区的青绿藻分布特征，相关实验数据正在分析整理中。
展开▼
