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外周血淋巴细胞γ-H2AX的RL/G值分析:一种新的用于辐射事故伤员分类诊断和剂量估算的方法

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目的：本研究目的是评价一种基于流式细胞分析的新的方法——即采用γ-H2AX的RL/G值(淋巴细胞中γ-H2AX含量与粒细胞中γ-H2AX的比值)用于辐射事故早期分类诊断和剂量估算的可行性.rn 材料和方法：血样收集和照射：在获得志愿者的知情同意书之后,利用肝素抗凝管收集62名志愿者外周血.除本底值分析实验之外,其他所有实验中的血样均来源于同样3名志愿者(2名男性,年龄为35岁和36岁,1名女性,年龄为36岁).血样37℃条件下采用钴-60照射源进行照射(剂量率为158cGy/min).照射后,血样在37℃条件下培养1、3、6、12、和24h收集,经固定、标记后分析.rn 结果：(1)在照射后1、3、6、12和24小时,淋巴细胞中γ-H2AX含量呈剂量依赖性增加,而粒细胞中γ-H2AX含量没有明显改变.据此,粒细胞可作为内部参照细胞,用于分析淋巴细胞中γ-H2AX含量,这样可以减少分析过程中的操作误差,增加方法的稳定性.下面提到的γ-H2AX的RL/G值代表外周血淋巴细胞中γ-H2AX与粒细胞中γ-H2AX含量的比值.(2)为了研究γ-H2AX的RL/G值在在健康人群中的本底水平,对62名健康志愿者(23名女性和39名男性中国人)外周血进行分析.γ-H2AX的RL/G值介于1.01～1.54之间,变异系数为9.94％,平均值为1.21±0.12.23名女性志愿者与39名男性志愿者之间没有明显差别(1.20±0.10VS1.22±0.15,P=0.4531).各年龄组之间γ-H2AX的RL/G值差别不明显(21-30岁、31-40岁、41-50岁和51-60岁组分别为1.18±0.09、1.22±0.13、1.20±0.14和1.21±0.09,p=0.7372).在62名志愿者中,12人有吸烟习惯.与不吸烟组相比,吸烟组的γ-H2AX的RL/G值并未明显增高(1.21±0.12VS1.17±0.08,P=0.2194).(3)照射后γ-H2AX的RL/G值的时间-效应分析.γ-H2AX的RL/G值在照射后1小时快速升高到2.78±0.32(2Gy)和5.79±0.84(10Gy),这种高水平持续到照射后3h,随后开始下降.2Gy照射后12h,γ-H2AX的RL/G值(1.81±0.14)高于未照射对照组(P=0.0133,p＜0.05),照射后24小时,γ-H2AX的RL/G值(1.40±0.01)仍然高于未照射对照组(P=0.0395,p＜0.05),但低于本底值中的最大值.10Gy379照射后24h,γ-H2AX的RL/G值(2.67±0.09)仍然明显高于未照射对照组(P=0.0006,p＜0.05).(4)γ-H2AX的RL/G值分析的实验重复性和个体间差异分析.为了分析实验重复性,在三个不同时间采集三名志愿者的外周血,进行三次独立实验.结果显示,在各个剂量照射后1小时,不同实验间差异性较小,变异系数均在10％以内.为了分析个体间的差异,三名志愿者的血样经0-10Gy照射后,分别培养1、3、6、12和24h,分析γ-H2AX的RL/G值.结果发现,除6Gy和8Gy照射后1小时的样品(分别为18.25和15.89)之外,所有样品的γ-H2AX的RL/G值的变异系数均小于15％.(5)剂量效应反应和曲线拟合.在选定的每一个时间点(照射后1、3、6、12、和24小时),γ-H2AX的RL/G值均以剂量依赖的方式增加.拟合了5个时间点(1、3、6、12和24h)的剂量效应曲线,1h：Y=0.501X+1.194,R2=0.95;3h：Y=0.798X+1.249,R2=0.913;6h：Y=0.21X+1.149,R2=0.938;12h：Y=0.174X+1.371,R2=0.953;24h：Y=0.099X+1.225,R2=0.966.在所有的剂量效应曲线中,y为γ-H2AX的RL/G值,x为照射剂量(Gy).rn 结论：研究表明,外周血淋巴细胞γ-H2AX的RL/G值分析可以作为一种辅助方法,用于辐射事故早期分类诊断和快速剂量估算,这种方法的应用价值还需要进一步研究和事故中验证.

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来源
《2015全国小儿泌尿外科学术会议》|2015年|377-379|共3页
会议地点成都
作者
王治东; 胡海亮; 胡明; 张学清; 王琪; 乔玉磊; 刘海翔; 沈丽萍; 周平坤; 陈英;
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作者单位

中华医学会小儿外科分会及泌尿学组;

四川省医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类放射病诊断学;
关键词
辐射事故; 分类诊断; 剂量估算; 淋巴细胞; 粒细胞; γ-H2AX含量; 数值比;

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