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辐射诱导对宫颈癌细胞IEX-1表达的影响

摘要

目的:探究紫外线B(LTVB)照射对人宫颈癌Hela细胞中IEX-I mRNA表达的影响,探讨IEX-1在HeLa细胞系中的作用及其作为宫颈癌基因治疗靶点的意义,为临床治疗宫颈癌提供依据。rn 方法:取对数生长期的HeLa细胞,接种于6孔板,细胞铺满板孔约80% ,PBS洗涤3遍,加入0.5mL PBS覆盖细胞;设置紫外线照射仪的发射波长为315nm。实验一:HeLa细胞分为5组,分别给予2,4,8,16,32mJ/cm2剂量的UVB照射;同时设未行UVB照射的HeLa细胞为对照组。照射30s后吸出PBS,加完全培养基培养2h后收集细胞。实验二:HeLa细胞分为5组,取实验一中能够明显诱导IEX-1表达的剂量的UVB照射细胞,30s后吸出PBS,加完全培养基继续培养,分别于培养1,2,4,8及16h时收集细胞。以上两实验每组设3个复孔,实验重复3次。rn 结果:1.HeLa细胞中IEX-1表达对UVB照射的剂量依赖性RT-PCR结果显示:不同浓度WB照射HeLa细胞后细胞内IEX-1mRNA表达量均有明显增高。随UVB照射剂量增高,HeLa细胞IEX-1mRNA表达量逐渐增高。2.UVB照射瞬时短暂HeLa细胞中IEX一1表达对的时间依赖性。rn 结论:本实验以波长为315nm的UVB照射HeLa细胞,检测不同剂量UVB照射细胞后IEX-1 mRNA的表达,结果显示,随照射剂量的增加,IEX-1 mRNA的表达水平呈升高的趋势;以32mJ/cm2照射HeLa细胞后培养不同时间点检测IEX-1 mRNA的表达,结果显示培养4h后IEX-1 mRNA的表达水平最高。说明了UVB照射可以诱导宫颈癌HeLa细胞系内的IEX-1的表达,而且这种诱导作用具有剂量和时间依赖性。IEX-1的这种辐射可诱导性赋予其巨大的临床应用潜能。首先,干预肿瘤细胞中IEX-1的表达水平有可能影响肿瘤细胞的生长、分化、增殖或凋亡,而IEX-1在HeLa细胞中的辐射诱导性为提高宫颈癌IEX-1的表达提供可能,使其可能成为宫颈癌靶向治疗的作用位点。因此,用IEX-1基因的启动子诱导肿瘤杀伤基因的表达,也可能为治疗宫颈癌的治疗提供一条新思路。

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