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刚地弓形虫Peroxiredoxin基因的克隆表达与免疫原性分析

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目的：对刚地弓形虫Peroxiredoxin(TgPrx)基因进行克隆、表达和免疫原性分析。rn 方法：收集、纯化RH株弓形虫速殖子，提取总RNA;设计合成引物并引入EcoRI和Xhol酶切位点，RT-PCR扩增编码TgPrx的基因片段克隆到原核质粒pET30a(+)中，经双酶切、PCR及测序鉴定阳性克隆;在大肠杆菌BL21/DE3中用IFTG诱导表达，表达产物经SDS-PAGE进行鉴定，重组蛋白用Western blotting分析其免疫原性。rn 结果：从弓形虫RH株eDNA中扩增出591bp的TgPrx基因片段，并成功构建重组质粒pET30a(+)/TgPrx;SDS-PAGE结果表明，目的基因在大肠杆菌BL21/DE3中高效表达。重组蛋白的相对分子量约32kDa，Western blotting显示其能被兔抗弓形虫免疫血清识别。rn 结论：RH株刚地弓形虫Peroxiredoxin可在原核表达系统中高效表达，该重组蛋白具有免疫原性，有望作为弓形虫疫苗的候选抗原。

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来源
《第十次全国生物制品学术会议》|2009年|p.65-68|共4页
会议地点兰州
作者
刘转转; 王海龙; 殷国荣; 马广源; 张建中; 凡振伟;
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作者单位

中国微生物学会;

中华预防医学会;

中国医药生物技术协会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类弓形体病;免疫血清学;
关键词
刚地弓形虫; 原核表达; 免疫原性; 免疫血清识别; 疫苗;

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