口腔粘膜念珠菌鉴定方法的比较

摘要

目的:比较多种念珠菌菌种鉴别方法,探寻最佳的念珠菌菌种鉴别方法。rn 方法:采集230例健康人群口腔粘膜样本,分别用玉米TWEEN80培养观察厚膜孢子法,糖发酵生化反应法,CHROMagar-念珠菌显色培养基法,ITS基因的限制性酶切多态性(RFIJP)法,ITS测序菌种鉴定法,鉴别念珠菌各菌种。rn 结果:有56例菌株至少通过一种方法检出念珠菌。玉米TWEEN80分离培养念珠菌37株,50例菌株ITS基因的测序鉴定鉴别出共8个菌种,白色念珠菌(C.albicans)29株,近平滑念珠菌(C.parapsilosis)10株,热带念珠菌(C.tropicalis)5株,Candida metapsilosis 1株,Lodderomyces elongisporus 1株,克柔念珠菌(Candida krusei;Issatchenkiaorientalis)1株,乙醇念珠菌(C.ethanoliea)1株,季也蒙念珠菌(C.guilliermondii)2株;CHROMagar念珠菌显色培养基法鉴定出3种菌株,分别是白色念珠菌,热带念珠菌,近平滑念珠菌;PCR—RFLP(聚合酶链反应-限制性片段长度多态性)法检出5种菌株,分别是白色念珠菌,热带念珠菌,近平滑念珠菌,季也蒙念珠菌,克柔念珠菌,和基因的测序鉴定一致率为91%;糖发酵生化反应法阳性标本占被检出真菌例数的46.4%(26/56)。rn 结论:ITS基因的测序法可以准确鉴定念珠菌各个菌种;PCR—RFIP能鉴定常见的菌种,但操作繁琐;CHROMagar念珠菌显色培养基法可以鉴别3种常见念珠菌菌种,操作方便、时间短。玉米TWEEN80培养观察厚膜孢子法,糖发酵生化反应法,缺乏足够的敏感度和特异性,难以准确鉴别各个菌种。

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