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南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因在毕赤酵母中的展示表达

摘要

通过基因组扩增得到南极假丝酵母脂肪酶B(CALB)基因,插入到构建的重组质粒pPIC9K—Folp将得到的重组质粒pPIC9K-Folp-CALB用电转移的方法转入毕氏酵母Gs115。rn 用含不同G418浓度的YPD平板筛选高拷贝重组子,在优化的条件下进行高密度发酵,离心收集菌体,获得10g酵母干粉/L,通过人工合成底物初步的测定酶活力约为45U/g干粉。说明CALB能在毕氏酵母-絮凝素中高效的展示表达,为进一步的定向进化奠定基础。

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