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EIAV驴白细胞弱毒疫苗株减毒过程第61代毒前病毒全基因组DNA的克隆与分析

摘要

马传染性贫血病毒(EIAV)弱毒株EIAVDLV是EIAV驴强毒株EIAVDV在驴白细胞传120余代减毒而成。为阐明EIAV疫苗的致弱机理,本研究选取减毒过程中兼有强毒株和弱毒株生物学特性的中间代次毒株EIAVDLV61(体外61代毒株),采用LA-PCR(Long accurate PCR)技术扩增几乎全长的前病毒基因组,获得了7941bp的片段。经T-A克隆和核苷酸序列测定,共得到16个EIAVDLV61的几乎全长的基因组克隆。测序结果显示,EIAVDLV61序列平均长为8234bp,16个克隆的核苷酸同源率为98.1±0.4%,与已发表的我国EIAV强毒辽宁株DIAVLV和疫苗株EIAVDLV的核苷酸同源率分别为98.0%和97.9%。本研究比较和分析了EIAVDLV61与EIAV强毒株和疫苗株基因组差异,为进一步探讨马传贫疫苗的致弱机理及免疫保护机制提供了有益的参考数据。

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