嗜酸乳杆菌S-层蛋白表面展示系统的构建

摘要

[目的]:旨在克隆和表达嗜酸乳杆菌S-层蛋白,用其构建能承载外源抗原表位的乳酸菌细胞表面展示系统.rn [方法]:运用PCR技术克隆出表达S-层蛋白SlpA基因序列全长1335bp,其中包括N-末端的信号肽和可变区,以及C-末端的锚定区域.通过酶切、连接将其插入大肠杆菌-乳酸菌穿梭表达载体pW425et,形成具有整合外源基因酶切位点的pW425et-S 载体,将其转化入胸苷酸合成酶缺陷型大肠杆菌感受态细胞X13中,SDS-PAGE电泳及Western-blotting分析检测表述情况.rn [结果]:重组菌表达出嗜酸乳杆菌S-层蛋白,同时在上清液中也检测到了表达的S-层蛋白.rn [结论]:成功地克隆嗜酸乳杆菌S-层蛋白基因,并构建表达质粒pW425et-S,为构建乳酸菌表面展示系统,开发乳酸菌活载体口服活菌疫苗的研究提供可行性操作平台.

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