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荔枝转基因胚性愈伤组织(TREC)原生质体高频率再生与体胚发生

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本研究以采用基因枪转化法,将外源htp和gus(uid A)基因转入荔枝(Litchi chinensis Soon.)晚熟优良品种‘下番枝’,并经筛选得到的荔枝转基因抗性胚性愈伤组织(Transgenic resistant embryogenic calli,TREC)细胞系为材料,进行高频率原生质体再生培养和体胚发生研究.研究结果表明：荔枝转基因抗性胚性愈伤组织分离的原生质体,在M12培养基(修改的MS附加1.0 mg·L-12,4-D+0.2 mg·L-1NAA+0.2 mg·L-1 BA+0.2 mg·L-1 KT+250 mg·L-1谷氨酰胺+50 ml·L-1CW(椰乳)+0.45 M葡萄糖和0.1 M蔗糖)上,以3.0×105个/mL的培养密度,采用海藻酸盐包埋悬浮方式进行暗培养,原生质体的分裂频率可高达18.78%.植板率达22.30%,小克隆形成频率达3.24%.获得的转基因愈伤组织原生质体来源的5个愈伤组织抗性细胞系中：抗性细胞系PQ811、PQ81.535为大量稳定表达GUS类型;PQ9221、PQ9223、PQ1016均为稳定不表达GUS类型.转基因原生质体来源的愈伤组织在T1(附加1.0 mg·L-12,4-D、2%蔗糖和0.7%琼脂的MS培养基)、T3(附加0.1 mg?L-1NAA、3.5 mg·L-1ZT、100 mg·L-1肌醇、5%蔗糖和1.0%琼脂的MS培养基)、T10(附加50 ml?L-1椰乳、5%蔗糖和1.0%琼脂的MS培养基)培养基上,采用分步培养诱导的方法可以诱导高频率体胚发生,并再生植株.

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来源
《中国园艺学会热带南亚热带果树分会第二届学术研讨会暨全国龙眼产业发展论坛》|2008年|129-143|共15页
会议地点福州
作者

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作者单位

中国园艺学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类荔枝;遗传育种;
关键词
荔枝; 转基因抗性胚性愈伤组织; 转基因原生质体; 体胚发生; 高频率再生;

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