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酶法制取五谷虫脂肪酸及其抗肿瘤活性成分的研究

摘要

许多对中药及天然药物的研究表明,油脂及脂肪酸类物质对各种癌症及肿瘤细胞有着不同程度的抑制以及杀灭活性。五谷虫粉中含有大量的油脂和脂肪酸成分,具有一定的抗癌作用,因此通过酶解处理五谷虫粉的石油醚提取物,来获得具有更高抗癌活性的脂肪酸药效成分。五谷虫粉石油醚提取物作为酶解的原料,在有机相中溶解后,以磷酸盐缓冲液作为水相,通过脂肪酶的水解作用得到高含量游离脂肪酸的提取物。首先通过单因素条件实验得到合适的脂肪酶加入量,酶解的时间和温度,缓冲溶液的pH,缓冲液和有机相加入比例以及料液比。然后,使用plackett-burman(PB)和中心复合设计(Central Composite Design)对上述的6个影响酶解效率的因素进行筛选,并对其中影响最为明显的3个因素料液比,酶解的时间和温度优化,得到的五谷虫脂肪酸含量达到95.36%的工艺条件为:酶解时间16h40m,酶解温度为39.5,料液比为1:7.65,缓冲溶液pH为8.0,缓冲液与有机相体积比为3:2,酶量为10mg·g-1。对脂肪酸含量为58.6%的样品进行了抗癌活性的检测,五谷虫脂肪酸(0.063 mg·mL-1)时经过72h,对HL-60 人白血病细胞株和A-549 人肺癌细胞株的抑制效应分别为94.3%和91.4%,表明经过酶解得到的五谷虫脂肪酸相较于五谷虫粉的抗癌活性有了大幅度的提高,具有较高的药用价值。

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