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应用TaqMan荧光定量RT-PCR检测猪肝中戊型肝炎病毒的研究

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摘要

目的：寻找猪肝食品戊肝病毒的敏感特异的快速检测方法,建立适用于猪肝样品中戊肝病毒检测的荧光RT-PCR方法.方法：针对四种型别戊肝病毒的设计的特异性引物和探针建立一套TaqMan荧光定量RT-PCR方法,并评价该方法的准确性和灵敏性.通过直接处理(方法一)与聚乙二醇处理(方法二)两种病毒提取方法,采用新建荧光定量RT-PCR检测人工染毒的猪肝样品并比较两种方法的处理效率.结果：所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR标准曲线显示各浓度具有良好的线性关系,相关系数为0.999.批内和批间重复实验相同稀释度标准质粒Ct值之间差异均不显著,可检测到戊肝病毒数量为102个拷贝.两种处理方法效果相差不大,Ct值分别为38.36和39.84,两种方法在100和10-2稀释度进行染毒时,所获得的样品Ct值配对资料定量比较具有统计学差异(P＜0.05).结论：所建立的TaqMan荧光定量RT-PCR方法具有灵敏度高、稳定性好、特异性强等特点,适用于HEV 的定量检测.方法二更加快捷,适用于长期监测.

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来源
《第四届中国食品安全高峰论坛》|2014年|377-383|共7页
会议地点广州
作者
LIN Hong; 林虹;
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作者单位

广东省微生物学会;

广东省食用菌行业协会;

国家广州生物产业基地公共实验中心;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类产品标准与检验;
关键词
猪肝食品; 戊型肝炎病毒; 荧光定量探针; 聚合酶链反应;

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