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猪抵抗素(resistin)表达载体的构建、表达及表达产物的纯化鉴定

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用 PCR方法扩增到抵抗素基因(RSTN)并将其亚克隆至pET-32a(+)表达载体,获得重组质粒pET-RSTN。将重组质粒转化大肠杆菌BL-21(DE3)感受态细胞,用IPTG诱导表达。SDS-PAGE检测结果表明,重组resistin蛋白分子量大小约30kDa。对表达条件如温度、IPTG浓度及诱导时间进行优化并用SDS-PAGE检测。结果表明,30℃、4h、IPTG浓度为1mmol/L时,可溶性重组resistin的含量最高。表达产物经Western blot检测证实是resistin蛋白,并用镍离子亲和层析的方法获得纯化的resistin蛋白。

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来源
《第七届中南地区实验动物科技交流会》|2007年|370-377|共8页
会议地点广州
作者
冷扬; 广东海洋大学现代生物化学中心; 刘铀; 刘艳芬; 王群; 潘颖斌; 高志杰;
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作者单位

中国实验动物学会;

广东省实验动物学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类基因载体;基因的表达;
关键词
抵抗素基因; 蛋白表达; 纯化鉴定; PCR方法扩增; resistin蛋白;

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