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猪卵母细胞体外成熟及乙醇孤雌激活研究

摘要

本试验探讨了不同基础培养液(mTCM-199、NCSU23)和PMSG、HCG浓度、作用时间对猪卵母细胞体外成熟的影响和乙醇及乙醇与各种化学试剂联合处理对猪体外成熟卵母细胞孤雌激活、孤雌生殖胚胎发育的影响,最终找到了最佳的猪卵母细胞体外成熟培养体系,并确定了乙醇孤雌激活的最佳浓度、作用时间和与不同化学试剂联合处理的最佳组合.试验结果得出:最佳的猪卵母细胞体外成熟培养体系为NCSU23+20IU/mlPMSG+20IU/mlHCG+10%PFF,激素作用时间为45h,成熟率可达到70.3+3.9%;乙醇的最佳激活浓度为8%,激活率为29.6+2.5%;乙醇激活的最佳处理时间为10分钟,激活率为32.6+4.1%:乙醇与CB+CHX联合处理的激活率最高,激活率为60.8+3.2%,卵裂率、3~4细胞率、6~8细胞率分别为45.1+3.0%、28.6+3.7%、8.7+1.2%;乙醇与CB+6-DAMP联合处理的激活率为51.7+1.9%,卵裂率、3~4细胞率、6~8细胞率分别为41.7+3.6%、30.3+4.3%、9.9+1.8%,虽然激活率、卵裂率低于乙醇与CB+CHX处理组,但3~4细胞率、6~8细胞率均高于乙醇与CB+CHX处理组(30.3+4.3%vs28.6+3.7%,9.9+1.8%vs8.7+1.2%)。因此,乙醇激活的最佳方法为:8%乙醇处理10分钟,CB+6-DAMP处理7小时.

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