高糖对牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡调节基因表达的影响

摘要

目的:研究不同浓度葡萄糖对培养的牛视网膜血管周细胞凋亡及凋亡调节基因Bcl-2、Bax表达的影响,并探讨Bcl-2、Bax对周细胞凋亡的调控.方法:在体外培养第3代近融合的视网膜血管周细胞中加入不同浓度的葡萄糖(5.5 mmol/L、15 mmol/L、25 mmol/L、35mmol/L)孵育6天后,应用MTT方法检测高糖下牛视网膜周细胞增殖情况;采用TUNEL法特异性标记凋亡细胞;运用免疫组化ABC染色法和RT-PCR测定Bcl-2、Bax基因的表达.结果周细胞在高糖下作用6天后,呈现出典型的细胞凋亡特征.高糖呈剂量依赖性促周细胞凋亡(r=0.959,P<0.01)和凋亡调节基因Bax的表达(蛋白水平r=0.966,P<0.01;mNRA 水平r=0.874,P<0.01)及抑制凋亡调节基因Bcl-2的表达(蛋白水平r=-0.964,P<0.01;mNRA 水平r=-0.912,P<0.01);周细胞的凋亡率与Bax/Bcl-2比率呈正相关(r=0.810,P<0.01). 结论:高糖以剂量依赖的方式促进周细胞凋亡,Bcl-2、Bax基因表达的改变参与了细胞凋亡的调控.

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