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人穿孔素N端肽段在真核细胞中的放射诱导表达研究

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目的：构建人穿孔素N端(hPFN-N)的真核放射诱导表达载体,并在放射诱导条件的刺激下研究hPFN-N的表达产物(rhPFN-N)在肺癌细胞SPC-A1中的分布及其对该细胞的细胞毒性作用。方法：以克隆有hPFN全长cDNA序列的载体pcDNA3.1(+)/hPFN为模板,用PCR扩增hPFN-N,将该基因片断克隆到含放射诱导启动子的真核表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-1中,以重组体稳定转染SPC-A1细胞,经过X射线的放射诱导后,应用RT-PCR、细胞免疫化学法检测hPFN-N蛋白的表达,用MTT法测定该蛋白对靶细胞的杀伤活性。结果：成功构建了真核放射诱导表达载体pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N.以重组体转染SPC-A1细胞后,用RT-PCR检测到hPFN-N mRNA的表达。细胞免疫化学法检测结果呈阳性反应,MTT法检测结果为rhPFN-N对靶细胞的杀伤活力为29.2％。结论：构建了pcDNA3.1(+)/Egr-hPFN-N真核放射诱导表达载体,在经过X射线的放射诱导后,hPFN-N能够在SPC-A1细胞的细胞膜上大量表达,表达产物rhPFN-N对靶细胞有明显杀伤活力。

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来源
《2007年全国感染性疾病实验室诊断研讨会》|2007年|104-108|共5页
会议地点南宁
作者
张蕾; 李芳秋; 韩艳玲; 朱锡旭;
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作者单位

《临床检验杂志》编辑部;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类肺肿瘤;
关键词
穿孔素; 放射诱导; 杀伤活性; 肺癌; 细胞毒性; 细胞免疫化学;

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