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抗鸡传染性贫血VP3蛋白单克隆抗体的制备

摘要

鸡传染性贫血(Chicken infectious anemia,CIA)是由鸡传染性贫血病毒(Chicken infectious anemia virus,CIAV)引起,以再生障碍性贫血和全身淋巴组织萎缩为主要特征的一种免疫抑制疾病.CIAV属圆环病毒科,圆环病毒属,基因组全长2.3kb左右,有3个部分或完全重叠的开放阅读框,分别编码VP1(51.6 kDa)、VP2(24 kDa)和VP3(13.6 kDa)三种蛋.VP1为病毒的唯一衣壳蛋白,也是主要的免疫原蛋白,与VP2蛋白共同作用可诱导产生较高的中和抗体;VP2为CIAV的非结构蛋白,可能作为一个分子伴侣参与病毒VP1空间构象的形成,最近发现VP2具有蛋白磷酸酶活性,但其在病毒感染中具体生物学功能尚不清楚;VP3是功能蛋白,和VP2的开放阅读框互相重叠,其编码基因全长366bp,在各毒株之间同源性较高(>95%).VP3是CIAV的致病因子,是病毒复制必需蛋白.VP3又称为细胞凋亡素(apoptin),它是一种很强的凋亡诱导剂,能诱导鸡胸腺细胞、成淋巴样细胞系、多种人恶性成淋巴样细胞系和人骨髓瘤细胞的凋亡,所以VP3作为一种潜在的抗肿瘤侯选药物,在恶性肿瘤细胞的控制治疗中也具有研究价值. 本试验在获得CIAV VP3蛋白的基础上,通过淋巴细胞杂交瘤技术制备了三株高效价的单克隆抗体,均具有良好的特异性,为进一步研究VP3的生物学特性及CIAV监测、诊断方法打下了基础.

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