本文利用ITS和Leptin促进体外成熟和体外培养的牛卵母细胞的发育和质量,探讨提高胚胎体外生产时的质量和数量的方法技术.试验组在体外受精的胚胎的培养液KS0M中添加10μl/ml浓度的ITS,结果使胚胎的桑椹胚率和囊胚率显著高于培养液中不加ITS的对照组胚胎(桑椹胚率:43.48％ vs 29.07％,囊胚率:22.83％ vs 11.63％,P＜0.05),卵裂率、正常分裂率和8细胞率与对照组差异不显著.说明在培养液中添加ITS能显著提高体外受精培养的桑椹胚率和囊胚率.另外在卵母细胞的体外成熟液中添加10ng/ml具有生物学活性的重组鸡Leptin成熟肽融合蛋白培养卵母细胞,试验组和对照组卵母细胞经体外成熟、受精后转入加有10μl/ml ITS的KSOM培养液进行体外培养.试验组卵裂率和正常分裂率极显著高于对照组(88.96％ vs 66.81％,61.11％ vs 29.36％,P＜0.01),8细胞率显著高于对照组(84.84％ vs 69.57％,P＜0.05).虽然Leptin培养的卵母细胞受精的桑椹胚率和囊胚率与对照组差异不显著,但最后的囊胚数量较对照组增加了一倍多.这些结果说明,在卵母细胞的体外成熟培养中添加Leptin对牛卵母细胞体外成熟有促进作用,可显著提高卵母细胞受精后早期胚胎的卵裂率、正常分裂率和8细胞率;在早期胚胎的体外培养液KSOM中加入ITS则能提高桑椹胚率和囊胚率;而Leptin和ITS的按顺序结合使用,则能够大大增加体外生产胚胎的桑椹胚和囊胚的数量,亦即胚胎体外生产的效率.
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