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基因枪法获得玉米转基因植株的研究

摘要

采用基因枪轰击转化技术将含有抗除草剂chlorsulfuron基因AHAS的PCD220质粒导入玉米愈伤组织,并再生出具有抗该除草剂的转基因植株,同时研究了影响玉米基因枪转化效率的因素.基因枪轰击时,金粉用量、轰击次数及轰击距离对愈伤组织的转化率有较大影响.转化时,以金粉用量100μg/枪,轰击2次,发射点与靶细胞的距离9cm最合适.对所获得的转化植株进行PCR分析及分子杂交鉴定,表明部分转化植株呈PCR阳性,转基因植株的总DNA Southern杂交后有明显的杂交信号,而非转化的阴性对照则PCR呈阴性,也无明显的Southern杂交信号,说明抗除草剂绿黄隆的基因AHAS已整合到玉米基因组当中,将转基因植株进行自交,获得了T0代的种子.

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