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绿色荧光蛋白基因转染猪骨髓基质干细胞

摘要

采用电穿孔法将带有GFP的质粒(pGFP-NEO)转染MSCs,经过G418筛选阳性克隆,用荧光显微镜检测GFP的表达情况.结果 以电压150V,20ms一次脉冲进行转染.转染GFP质粒的MSCs能在含有G418的培养基中生长,而未转染的MSCs不断死亡.转染24h后即能观察到少量荧光细胞,一个月后大部分荧光细胞呈集落样生长,荧光表达较强,转染率为25%~30%.稳定表达的阳性克隆细胞,已稳定表达6个月.结论 GFP基因能在MSCs中进行有效的可持续、稳定、高效表达;因此,转染GFP的MSCs能作为研究MSCs的诱导分化及生物细胞工程治疗的载体细胞.

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