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流式细胞仪检测大鼠外周血微核的方法学验证

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目的：对流式细胞仪(flow cytometry,FCM)检测大鼠外周血微核(micronucleus,MN)的方法进行验证,在本测试机构内建立自动化微核检测方法.rn 方法：选用6～7周龄雄性SD大鼠20只,随机分成4组,分别灌胃给予生理盐水或环磷酰胺(2.5,5.0和10mg/kg),每日一次,连续给药三天,给药体积为10mL/kg.首次给药前当天(Day1)进行称重以计算动物给药量,处死前(Day4)称重一次以计算动物体重变化.每次给药前和给药后约1～2小时,以及动物处死当天各进行一次详细临床观察.末次给药后22～24小时,经颈静脉收集血液后将动物安乐死并收集一侧股骨骨髓细胞.rn 结果：本实验中对照组的微核率均在本实验室历史对照数据范围内或文献报道数据范围内，中、高剂量水平环磷酰胺给药后也诱导出显著高于对照组的微核率且各给药处理组骨髓或外周血中PCE/RET占总红细胞的比例均不低于对照组的20%或5%，符合试验有效性的标准；所有动物均未出现异常临床症状或体重降低。与对照组相比，高剂量给药组外周血中%RET下降了63.2%，随机选取10mg/kg给药组两只大鼠血样，连续三天分别进行标记和检测以计算日间精密度，并在其中一天对两份血样分别标记和检测十次以计算日内精密度。rn 结论：本测试机构的FCM检测外周血微核的方法可用于检测大鼠体内微核实验。

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来源
《2016年第六届全国药物毒理学年会》|2016年|90-91|共2页
会议地点重庆
作者
许雪萍; 王茂伟; 徐宁; 王磊; 高立文;
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作者单位

中国毒理学会;

中国药学会;

中华中医药学会;

中国药理学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类药理的实验方法与技术;
关键词
实验药理; 流式细胞仪; 微核率; 方法学验证;

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