首页> 中文会议>2016年第六届全国药物毒理学年会 >应用大鼠体内彗星试验检测黄藤素注射液的遗传毒性

应用大鼠体内彗星试验检测黄藤素注射液的遗传毒性

摘要

目的:选用SD雄性大鼠肝细胞进行体内碱性彗星试验,观察不同剂量的黄藤素注射液对大鼠肝细胞DNA的损伤.rn 方法:将25只雄性大鼠随机分为黄藤素注射液40、20、10mg/kg.bw剂量组、溶媒对照、阳性对照(EMS,100mg/ml),每组5只.溶媒对照及黄藤素注射液各剂量组肌肉注射给药3次,阳性对照组灌胃给予2次,动物于末次给药后3h用0.45%的戊巴比妥钠腹腔注射麻醉,取肝左叶中间部分约5mm3,制作单细胞悬液,按照Trevigen彗星电泳试剂盒操作说明进行制片,置于2~8℃冰箱中裂解约18h,用预冷的纯水轻轻冲洗后置于冷的碱性裂解液中解旋20min,在22V、300mA条件下电泳30min,用预冷的纯水冲洗后置于中和缓冲液中10min,然后在无水乙醇中浸泡约10min,37℃干燥箱中干燥后用0.01%吖啶橙溶液染色约3~5min,纯水冲洗2~3遍.染色好的标本置于荧光显微镜上,在20×物镜下,用紫外光进行观察,选取玻片中间位置且密度适中的细胞进行拍照和分析.rn 结果:阳性对照组大鼠肝细胞的尾长、尾距及尾部DNA含量(%)均明显高于溶媒对照组,组间比较均有显著性差异(p<0.01);而黄藤素注射液40、20、lOmg/kg.bw剂量组大鼠肝细胞的尾长、尾距及尾部DNA含量(%)与溶媒对照组比较均无显著性差异(p>0.05)。rn 结论:黄藤素注射液在40mg/kg.bw剂量下对大鼠肝细胞的DNA无明显损伤作用。

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