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二歧鹿角蕨绿色球状体玻璃化法超低温保存的研究

摘要

采用玻璃化法对二歧鹿角蕨绿色球状体(GGB,Green globular bodies)进行超低温保存研究.以继代培养30d的GGB为试验材料,将继代培养30d的GGB切成0.5~1 mm的小块,室温(22~25℃)下,在含2M甘油和0.4M蔗糖的溶液中预处理20min,0℃下玻璃化溶液(PVS2)处理50min,投入液氮(LN2)中保存,24h后,在40℃水浴中快速化冻,再用Unloading溶液(含1.2M蔗糖的MS盐溶液)洗涤3次,每次10min.冻后的GGB重新接种于含0.5mg/L 6-BA和0.1 mg/L IBA的MS培养基上,暗培养一周后转入正常光照下培养,30d后统计成活率可达97.9%.结果表明,利用玻璃化法超低温保存技保存蕨类植物绿色球状体是可行的.

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