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奶牛饲料中的动物源性成分PCR检测方法的建立及应用

摘要

目的: 进一步完善现有动物源性饲料检测方法,建立快捷、准确、可靠的PCR方法检测饲料中的动物源性成分。rn 方法: 首先根据牛、羊、猪、鸡、鱼以及马的mtDNA的16S rRNA基因序列选用了一对通用引物,初步判断样品中是否含有动物源性成分;然后针对牛、羊、猪、鸡四种动物线粒体mtDNA中的保守序列,分别选用了四对特异性引物进行PCR扩增,扩增的目的片段大小分别为271bp,274bp,149bp,266bp;最后,对所建立的方法作了进一步的验证。rn 结果: 利用本文所选用的通用引物、PCR反应体系以及相应的反应条件,建立了从未知样品中简便而快速的检测出饲料样品中是否含有动物源性成分的PCR方法;利用本文所选用的针对不同动物的特异性引物,建立了鉴定牛、羊、猪、鸡这四种动物源性成分的方法,该方法最低检测限可达0.1%。rn 结论: 本文所建立的检测饲料中动物源性成分的方法不仅价格低廉,操作简便,而且结果准确、可靠,因此可作为饲料中动物源性成分的鉴定方法之一。

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