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表达PRRSV GP4和GP5双表位多串联肽的真核重组质粒在小鼠的免疫效应

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采用重叠区扩增基因拼接法(gene splicing by overlap extension, gene SOEing)技术,将编码PRRSV美洲型毒株BJ-4的GP4的aa33~70(E4)和GP5的aa29~60(E5)核苷酸片段进行串联,获得两个多表位串联基因E54-2和E54-4。将这2个基因分别克隆至pcDNA3.1(+),构建出真核表达重组质粒pcDNA3-E54-2和pcDNA3-E54-4,将其分别转染P815细胞,间接免疫荧光试验表明,重组质粒在真核细胞中能稳定表达目的蛋白。用这2种真核表达重组质粒分别免疫小鼠均能诱导体液免疫反应,产生特异性的抗GP4和GP5抗体;4免后3周,免疫小鼠血清中和抗体效价分别为1:16和1:28。重组蛋白GST-GP4和GST-GP5能够阻断其对PRRSV的中和能力。证明了所选表位是中和表位。该实验结果对设计PRRSV表位疫苗具有理论指导意义。

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来源
《第二届中国畜牧科技论坛》|2005年|654-661|共8页
会议地点重庆
作者
付利芝; 杨汉春; 郭鑫;
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作者单位

中国农学会;

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类
关键词
PRRSV; GP4和GP5; 表位; 免疫反应; 小鼠;

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