ROR1基因在人前脂肪细胞分化前后表达

摘要

背景:人抵抗素在产生胰岛素抵抗的过程中发挥重要作用,但其受体迄今为止没有明确.受体酪氨酸激酶样孤儿受体1(,ROR1)是属于ROR家族具有1型糖基化的膜蛋白.最近在鼠前成脂细胞(3T3L1)研究模型上发现抵抗素通过与ROR1结合发挥对细胞糖脂代谢影响。但在人前体脂肪细胞抵抗素是否通过与ROR1相互作用,发挥对脂肪细胞糖脂代谢的影响,从而诱发胰岛素抵抗还未见报道。明确ROR1在人前脂肪细胞以及向成脂分化后的表达情况将为进一步研究抵抗素与RORI相互作用调控细胞的糖脂代谢分子机制提供实验基础。rn 目的:观察ROR1基因在人前体脂肪细胞以及向成脂分化前后的表达。rn 方法:从人脂肪组织内应用酶消化方法,分离并培养人前脂肪细胞。应用流式细胞术进行细胞表型鉴定,应用成脂肪诱导试剂盒进行人脂肪前体细胞向脂肪细胞诱导,诱导的成脂细胞应用油红O染色鉴定。应用RT-PCR进行RORI基因两个变异体表达。rn 结果:通过形态学观察以及流式细胞术表型鉴定,成功从人脂肪组织中分离并体外扩增前脂肪细胞,油红O染色观察显示分离培养人脂肪前体细胞能有效向脂肪细胞分化。RT-PCR结果显示RORl基因两个变异体在人脂肪前体细胞具有表达,在分化为脂肪细胞后,ROR1基因变异体1表达没有改变,而变异体2表达下降。rn 结论:RORl基因的两个变异体在人脂肪前体细胞均具有一定表达,但在向脂肪细胞分化后,变异体l的表达没有改变,而变异体2表达下降。

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