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传染性法氏囊病毒结构蛋白基因VP3的克隆与原核表达

摘要

本文利用PCR(PolymeraseChainReaction)技术扩增出IBDV的结构蛋白基因VP3,将其克隆到表达载体pPROEX-HTa中,获得重组质粒命名为VP3/PA,经PCR、酶切和序列分析鉴定表明,插入的位置、大小和读码框均正确.SDS-PAGE检测表明,经重组质粒VP3/PA转化、诱导的受体菌E.coliDH5α能表达结构蛋白基因VP3,约33kDa,表达量达到了菌体总蛋白的33.9﹪,经Westernblot等检测表明,诱导表达的抗原蛋白能与vvIBDV阳性血清发生特异性反应.这为IBDV血清学诊断方法的建立打下了基础.

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