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丹参诱导人脐带间充质干细胞向神经样细胞分化研究

摘要

目的:探讨中药丹参注射液的神经诱导作用及其机制,研究人脐带华尔通氏胶来源的间充质干细胞(MSCs)的向神经细胞分化的可能性。方法:从人脐带华尔通胶培养MSCs,用丹参和8-巯基已醇诱导人脐带来源的MSCs分化,用免疫细胞化学方法对分化和未分化的细胞进行鉴定;半定量RT -PCR检测诱导前后的细胞神经相关基因表达。结果:从人脐带分离、培养的基质细胞,体外生长形态类似于成纤维细胞,可以维持在未分化状态稳定增殖,体外增殖超过10代。表达MSCs的表面标记,造血细胞表面标记和与移植免疫排斥相关的表面标记不表达或低表达。丹参和β-巯基已醇一样,可诱导人脐带MSCs向神经样细胞分化,分化的细胞表达神经干细胞的标记巢蛋白(Nestin),神经元的标记β-Ⅲ类神经微管(β - TubulinⅢ)和神经微丝(NF),以及神经胶质细胞的标记胶质纤维酸性蛋白(GFAP),丹参诱导MSCs分化的细胞形态好,表达神经元标记的细胞病比例高。在适合丹参诱导条件下,约60%的细胞表达β- TubulinⅢ和NF,40%的细胞表达GFAP。RT - PCR检测证实,经丹参诱导前和诱导后的MSCs均表达神经细胞的基因Pleiotrophin,诱导后的表达明显增强,诱导后的MSCs表达神经干细胞相关基因Nestin。结论:丹参能诱导人脐带华尔通胶来源MSCs向神经细胞分化,表达神经细胞的相关标记,丹参诱导MSCs向神经细胞分化的机制同促进MSCs神经基因的表达有关,中医丹参可作为安全有效的神经诱导剂。

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