Notch1 siRNA抑制小鼠恶性黑色素瘤细胞增殖的体内外研究

摘要

目的:应用小干扰RNA(siRNA)抑制小鼠恶性黑色素瘤细胞Notch1表达,探讨其对小鼠恶性黑色素瘤细胞体内外增殖的影响.rn 方法:靶向Notch1基因的siRNA转染小鼠恶性黑色素瘤细胞株B16F1,诱导RNA干扰,采用RT-PCR、Westernblot、MTT法及细胞克隆试验体外检测细胞Notch1基因和蛋白表达及细胞增殖、克隆形成变化.随后将转染或对照细胞皮下接种于同基因C57BL/6小鼠,在成瘤过程中瘤内注射相应siRNA,记录肿瘤生长情况并绘制生长曲线,处死动物后取肿瘤比较各组肿瘤体积,并行HE及免疫组化染色观察肿瘤组织病理学变化和Notch1蛋白表达情况.rn 结果:Notch1 siRNA转染B16F1细胞后,细胞增殖能力、克隆形成率及小鼠体内成瘤等均受到抑制(P<0.01),免疫组化显示siNotch1转染组Notch1蛋白表达阳性细胞百分比明显低于对照组(P 均<0.01).rn 结论:靶向Notch1基因的siRNA可通过降低细胞Notch1的表达抑制小鼠恶性黑色素瘤细胞的增殖与生长,可作为治疗恶性黑色素瘤的新方法.

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