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毒害艾美耳球虫微线蛋白-2基因在减毒沙门氏菌的表达及免疫保护效果研究

摘要

本研究成功构建了表达鸡毒害艾美耳球虫(Eimerianecatrix)广东株(GD)微线蛋白-2基因(EnMIC2)的重组减毒鼠伤寒沙门氏菌,在IPTG诱导下获得了EnMIC2的高效表达,SDS-PAGE分析表明,表达产物约占菌体总蛋白的8.6﹪,分子量大小约为35kDa.与抗E.necatrix的高免血清进行Western Blotting,结果为阳性.将重组减毒沙门氏菌以10<'8>和10<'9>CFU/鸡免疫4日龄岭南黄肉鸡,免疫后两周血清中可检测到特异性IgG,三周时抗体水平达到峰值,同时可在肠道检测到特异性IgA的分泌.免疫接种后三周,试验鸡分别经口攻击感染5000个E.necatrix(GD)孢子化卵囊,结果显示免疫组与非免疫组有相似的排卵囊曲线;但10<'8>和10<'9>CFU免疫组的卵囊总产量分别能降低26.62﹪和48.92﹪.

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