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高致病力禽流感毒株NP基因的克隆及其在E.coli中的表达

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以禽流感分离株A/chicken/Hubei/326/2002病毒RNA为模板,采用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术,扩增了NP基因的cDNA,全长1580bp,将此扩增产物克隆进pMD18-T载体,进行了重组质粒的酶切鉴定.氨基酸序列分析表明,与GenBank中收录的AIV其它病毒株NP全基因的同源性在92﹪以上.进一步克隆NP基因主要抗原表位区(1000bp),构建原核表达质粒pET-NP',经IPTG诱导,在E.coli BL21(DE3)中获得表达,SDS-PAGE显示,表达的蛋白分子量为 34kD,并形成包涵体.Western印迹分析表明,表达蛋白能与AIV标准阳性血清发生特异性反应,证明NP基因获得了表达,表达蛋白具有生物学活性.

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来源
《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》|2004年|352-356|共5页
会议地点贵阳
作者
王贵华; 金梅林; 赵思婷; 张瑞华; 陈焕春;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类转化及克隆;
关键词
禽流感(AIV); NP基因; 克隆; 表达; 逆转录聚合酶链反应; 血清学;

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