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禽呼肠孤病毒σ<,3>基因的克隆和表达

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采用RT-PCR技术扩增禽呼肠孤病毒σ<,3>基因,将σ<,3>基因克隆至PGEX-T载体上,测序结果表明插入的片段为σ<,3>目的基因.切下目的基因σ<,3>,重组到含有谷胱甘肽(GST)的融合蛋白质核表达载体PGEX-4T-1,获得重组质粒经PCR酶切以及序列分析鉴定,表达σ<,3>组织插入的位置,大小和阅码框架均正确,表明成功构建了融合表达载体PGEX-σ<,3>.构建好的重组质粒,经1mmol/L IPTG诱导,在大肠杆菌DH<,5α>中得到了表达.融合蛋白GST-σ<,3>的分子量为60kD,以包涵体形式存在.Western-Bolt分析表明,融合蛋白能够与ARV阳性血清发生特异性反应,表明该重组蛋白具有良好的抗原性和特异性.

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来源
《中国畜牧兽医学会禽病学分会第12次学术研讨会》|2004年|197-200|共4页
会议地点贵阳
作者
谢芝勋; 邓显文; 刘加波; 庞耀珊; 唐小飞; 廖敏;
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作者单位

中国畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类转化及克隆;
关键词
禽呼肠孤病毒; σ,3基因; 表达; PGEX-4T-1;

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