嗜水气单胞菌生物被膜的特性与相关基因的克隆测序

摘要

建立嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila,Ah)的生物被膜(bilfilm,BF)体外形成模型,用银染法及扫描电镜(SEM)观察检测致病株AhJ-1、N-1及非致病株W-1、4332株产生BF的情况,同时检测温度和消毒剂对AhJ-1株的FC和BF细菌的影响.发现AhJ-1、N-1株可形成BF,Ah W-1、4332株不形成BF.BF细菌经85℃30min,-20℃80d,0.01%新洁尔灭处理后尚有存活,而FC细菌几乎无存活细菌.用AhJ-1的FC和BF细胞细菌分别攻击小鼠,发现两者均具有强致病性.根据已发表的Ah A1株的转录调节蛋白(AhyR)基因核苷酸序列,设计并合成了一对引物,以AhJ-1、N-1、W-1、4332株的基因组为模板,通过PCR,检测上述4个菌株,将AhJ-1株的扩增产物,测序并分析.发现致病性AhJ-1、N-1株可扩增出912bp的核苷酸片段、而非致病性AhW-1、4332株无该基因,表明Ah的AhyR基因不仅与生物被膜的形成有关,也与细菌的毒力有关.该菌株的AhyR基因与已发表的Ah AhyR基因的同源性达99%.

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