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人外周血NKT细胞体外扩增及细胞内细胞因子表达的研究

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目的:建立人外周血自然杀伤T细胞(NKT)体外扩增的方法及检测NKT细胞内细胞因子表达.方法:采用不同的方法从人外周血单个核细胞(PBMC)和纯化T淋巴细胞中扩增TCRVα24<'+>/TCRVβ11<'+>NKT细胞并采用细胞内细胞因子流式细胞术检测手段测定NKT细胞中IL-4,IFN-γ、TNF-α分泌水平.结果:体外扩增效果较好的是在PBMC中的α-半乳糖神经酰胺(α-Galcer)组和DC、α-Galcer组,以及在纯化T淋巴细胞中的DC、α-Galcer组.这3组NKT细胞扩增19天后分别占淋巴细胞的(25.5±7.2)﹪,(18.2±8.2)﹪和(24.8±5.5)﹪,NKT细胞分别扩增了(15.1±9.1)×10<'3>倍,(21.8±17.3)×10<'3>倍和(23.0±16.7)×10<'3>倍,与其它各组有显著性差异(P<0.01).扩增过程TCRVβ11<'+>NKT细胞中分泌IL-4,IFN-γ和TNF-α的细胞比例均高于TCRVβ11<'->T淋巴细胞(P<0.05).结论:本研究结果表明α-Galcer具有体外大量扩增NKT细胞的能力,同时α-Galcer的激活能力受CD1d分子的限制.由于PBMC中的单核系细胞也表达CD1d分子,因此直接从PBMC扩增NKT也能获得良好的效果.

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来源
《上海市第三届BIO-X研讨会暨2003生物物理学术年会》|2003年|53-57|共5页
会议地点上海
作者
范华骅; 郑滨; 刘嬿; 高跞; 高峰; 陆华中;
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作者单位

上海市科学技术学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类免疫细胞生物学;
关键词
半乳糖神经酰胺; 细胞因子; 淋巴细胞; 体外扩增; 医学免疫学;

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