高通量测序数据中家蚕环形RNA的筛选与鉴定

摘要

基于环行RNA的结构特征和形成特点,开发了一个环行RNA预测软件,该软件可以从去除rRNA的总RNA高通量测序数据中预测环形RNA的存在。利用该预测软件分析家蚕数据库中去核糖体总RNA高通量测序数据,预测了300多个家蚕体内可能存在的环形RNA基因片段,这些潜在的环行RNA基因的剪切边界中都符合AG和GU特征,进一步实验验证,对选择的预测环形RNA进行相对引物和相反引物的PCR鉴定,与相应基因组对照的PCR结果进行比较,环行RNA基因的相对和相反引物都能够扩增出预期的目的条带。PCR鉴定阳性的环形RNA进一步进行Northern Blotting鉴定。同时,生物信息学分析表明,这些环行RNA存在大量的家蚕microRNA结合位点。通过实验检测结合生物信息学方法,在家蚕中成功鉴定了大量环形RNA分子,对研究环形RNA分子在家蚕中的基因调控功能打下基础。

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