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雷竹SOC1蛋白原核表达及纯化

摘要

SUPPERSSOR OF CO OVEREXPRESSION1(SOC1)是含有MADS-box结构域的转录因子,整合四条经典的成花途径.为了揭示雷竹PvSOC1(Phyllostachys violascens)蛋白的结构形态及具有的生物学功能,课题组开展了雷竹PvSOC1 蛋白质体外可溶性表达实验,构建了原核表达载体,并在大肠杆菌E.coli 细胞中尝试重组蛋白的诱导表达.从蛋白不同结构域、诱导时间和诱导温度等方面对蛋白的可溶性表达情况进行了分析,获得了雷竹PvSOC1的IKC 结构域在原核表达系统中高可溶性的表达条件.最后以pET-GST为表达载体,E.coli (Rosetta)为宿主菌株,37℃诱导表达5h,获得不同结构域的PvSOC1 可溶性蛋白.通过GST 亲和层析柱及分子层析色谱柱分离纯化,表明PvSOC1蛋白以二聚体形式存在,本研究为今后开展SOC1 蛋白质结构与功能之间的关系打下了重要的理论基础.

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