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利用低温诱导表达系统高效表达可溶性重组猪干扰素-α8

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猪干扰素-α(PoIFN-α)具有广谱的抗病毒作用.目前,重组猪干扰素-α大都通过大肠杆菌表达系统获得,但均以不可溶、无活性的包涵体形式存在.本研究中,通过优化密码子、筛选低温诱导表达载体以及优化表达条件,获得了可溶的、具有生物活性的重组猪干扰素-α8.首先,将密码子优化后的猪干扰素-α8克隆至低温表达载体pColdⅡ,然后将该重组表达载体转化入大肠杆菌感受态细胞BL21(DE3),并通过IPTG诱导表达.通过优化IPTG的诱导浓度和诱导时间,最终获得可溶表达的重组猪干扰素-α8.随后,利用镍柱对所得重组蛋白进行纯化,最终的纯化蛋白量可达100mg/L培养液,经Western blot验证.该纯化蛋白对水疱性口炎病毒的抗病毒活性达1.0×109IU/mg.本研究提供了一种可生产大批量具有可溶性和生物活性的重组猪干扰素-α8的方法,可用于研究和生产.

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来源
《上海市畜牧兽医学会2017年学术年会》|2017年|97-105|共9页
会议地点上海
作者
Ye Xia; 夏叶; Jiahong Guo; 郭佳宏; Hongli Ling; 凌红丽; Denian Miao; 缪德年;
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作者单位

上海市畜牧兽医学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类 S828.1;
关键词
猪; 干扰素-α8; 密码子; 表达载体; 低温诱导;
入库时间 2022-08-17 11:15:24

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