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首页> 中文会议>第二十九届全国中西医结合消化系统疾病学术会议 >柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠肠粘膜屏障的影响及机制研究

柴黄清胰活血颗粒对重症急性胰腺炎模型大鼠肠粘膜屏障的影响及机制研究

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目的:探讨"柴黄清胰活血颗粒"对重症急性胰腺炎(severe acute pancreatitis,SAP)模型大鼠肠粘膜屏障功能的影响及作用机制. 方法:选用雄性健康SD大鼠120只,采用完全随机法分为5组:假手术组、SAP模型组、柴黄清胰活血颗粒低浓度组、柴黄清胰活血颗粒中浓度组、柴黄清胰活血颗粒高浓度组,每组各24只.通过向胰胆管内逆行注射3.5％牛磺胆酸来诱导SAP模型.待造模成功的大鼠麻醉苏醒后立即进行灌胃,每4小时1次,按1ml/100g体重给药,高、中、低浓度组分别予高、中、低浓度柴黄清胰活血颗粒溶液灌胃(中浓度为0.1g/ml,高、中、低浓度比分别为4∶2∶1),模型组、假手术组予以等量生理盐水灌胃.造模第6h、12h、24h每组各取8只大鼠麻醉后开腹,观察胰腺出血坏死、肠积气情况;取腹主动脉血制备血清,分别检测血淀粉酶、二胺氧化酶(diamine oxidase,DAO)、D-乳酸、内毒素;取胰腺、十二指肠组织予以HE染色后在光镜下观察;并运用免疫组化法检测小肠黏膜紧密连接蛋白Occludin的表达. 结果:1、建立模型:大鼠造模6h后可见胰腺组织出现片状出血和紫黑色坏死;HE染色光镜下可见胰腺间质水肿、点片状出血、炎细胞浸润、灶性变性坏死;血淀粉酶有不同程度升高.上述观察结果均符合SAP改变,提示造模成功.2、血淀粉酶:与假手术组比较,模型组及高、中、低浓度组的血淀粉酶在第6、12、24小时均升高(P＜0.05).3、第12小时的D-乳酸低浓度组分别与高、中浓度组比较有差异(P＜0.05),第12小时低浓度组的DAO比模型组高(P＜0.05),第24小时中浓度组的DAO比模型组高(P＜0.05),除第24小时低浓度组的DAO比高浓度、中浓度组低(P＜0.05)外,其它浓度组组间未见明显差异.4、胰腺组织HE染色光镜下显示:模型组胰腺组织受损严重,且随着时间递增逐渐加重,第bh即可见胰腺间质水肿、点片状出血,炎细胞浸润,灶性变性、坏死.高、中、低浓度组第6h与模型组比较未见明显改变,而第12h、24h与模型组比较损伤有所减轻.高、中、低浓度组同时间点对比,胰腺组织损伤好转幅度由大到小依次为高浓度组、中浓度组、低浓度组.胰腺病理学评分:第24小时高、中、低浓度组病理学评分较模型组有显著变化,且呈降低趋势(P＜0.05);第24小时高、中、低浓度组的病理学评分组间比较均有统计学差异(P＜0.05).5、大鼠十二指肠HE染色光镜下显示:模型组肠粘膜受损严重,且随着时间递增逐渐加重,第6h即可见肠绒毛充血水肿,大量中性粒细胞浸润、杯状细胞减少,顶端上皮坏死、脱落,溃疡形成.第12h、24h高、中、低浓度组与模型组比较损伤均有所减轻.6、大鼠十二指肠肠粘膜紧密连接蛋白Occludin的表达显示:模型组及高、中、低浓度组的细胞浆、细胞膜表达水平均较假手术组显著下降,提示SAP大鼠造模成功后,肠黏膜组织中Occludin的表达减弱.而高、中、低浓度组与同时间点的模型组比较,Occludin的表达逐渐恢复,且随着时间递增表达逐渐增强. 结论:早期应用柴黄清胰活血颗粒能够改善重症急性胰腺炎模型大鼠胰腺组织及肠道黏膜损伤,其机制可能与降低大鼠血清乳酸、血浆内毒素含量,上调Occludin蛋白的表达有关,从而起到改善肠黏膜屏障功能的作用.

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