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草莓镶脉病毒SVBV的RT-PCR检测

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本研究根据草莓镶脉病毒基因组序列设计PCR引物,用于筛选不同草莓样品,通过优化RT-PCR反应体系,建立了能稳定灵敏的检测草莓镶脉病毒技术体系.应用检测体系,成功对SVBV病毒侵染的草莓叶片材料进行了RT-PCR扩增,得到了期望大小的条带278bp特异带.测序后经blast序列比对,结果表明该特异带为草莓镶脉病毒序列.以此片段利用pEASY-T5Zero克隆载体构建重组质粒作为标准品,将标准重组质粒用NanoDrop2000进行浓度检测,按10倍梯度稀释成108～101拷贝/μl,建立了检测SVBV的SYBR Green-Ⅰ荧光定量PCR方法.结果表明,此方法标准曲线的相关系数大于0.99,敏感性可达到101拷贝/μl,约为普通PCR的1000倍;用该方法检测了部分草莓品种的DNA样品.该方法具有很高的敏感性和稳定性,可用来快速检测草莓植株是否感染SVBV.

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来源
《第十届中国（大连·金州）草莓文化旅游节会议》|2015年|88-95|共8页
会议地点大连
作者
MIAO Li-xiang; 苗立祥; RONG Ning-ning; 荣宁宁; ZHANG Yu-chao; 张豫超; YANG Xiao-fang; 杨肖芳; ZHANG Qin; 张琴; JIANG Gui-hua; 蒋桂华;
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作者单位

中国园艺学会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类多年生草本果类病虫害;
关键词
草莓镶脉病毒; 重组质粒; 浓度检测; 逆转录聚合酶链式反应;

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