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大肠杆菌mrcB基因敲除对生物膜形成能力的影响

摘要

目的:探讨mrcB基因对大肠埃希菌生物膜形成能力的影响. 方法:以大肠埃希菌MG1655为研究对象,将pKD46质粒转入MG1655感受态细胞.以质粒pKD3为模板扩增氯霉素抗性基因片段,并将其转化入MG1655/pKD46,氯霉素抗性平板筛选阳性克隆.利用pCP20质粒将氯霉素抗性基因删除,从而获得MG1655mrcB基因缺失菌株.采用96孔板结晶紫染色法比较MG1655野生株与mrcB基因缺失株生物膜形成能力的差异. 结果:氯霉素抗性基因消除后的mrcB基因缺失株PCR产物长度为611bp,测序鉴定正确,成功构建MG1655/△mrcB.mrcB基因缺失株的生物膜形成能力显著低于野生株(P<0.05). 结论:mrcB基因对细菌生物膜的形成具有重要的调控作用.

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