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UPLC MS/MS法测定乙酰胆碱酯酶及丁酰胆碱酯酶抑制活性

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目的：建立一种快速稳定可靠的UPLC MS/MS方法用于筛选具有乙酰胆碱酯酶(AChE)及丁酰胆碱酯酶(BChE)抑制活性的化合物. 方法：建立一种测定乙酰胆碱(Ach)和丁酰胆碱(Bch)在酶反应后共有产物胆碱含量的UPLC MS/MS方法,对该方法的方法学进行了方法学验证,对影响酶反应的试验因素(反应温度、反应时间、底物浓度及酶浓度)进行了考察. 结果：建立的方法快速(检测时间1.2min)、灵敏(0.036μM),酶反应的反应温度为25℃、反应时间为20min、酶浓度为0.0035unit/mL(AChE)和0.008unit/mL(BChE)、底物浓度为5.505μM(AChE)和,7.152μM(BChE),并采用该方法对骆驼蓬中分离获得的生物碱化合物进行了活性筛选. 结论：建立了一种快速稳定可靠的UPLC MS/MS方法用于筛选具有乙酰胆碱酯酶(AChE)及丁酰胆碱酯酶(BChE)抑制活性的化合物.

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来源
《2014年上海市研究生学术论坛：中医药的协同创新》|2014年|266-274|共9页
会议地点上海
作者
刘伟; 王长虹;
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作者单位

上海市学位委员会;

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会议组织
正文语种
原文格式 PDF
中图分类植物药;有效成分的分离与提取;
关键词
天然植物; 乙酰胆碱酯酶; 丁酰胆碱酯酶; 抑制剂; 活性筛选;

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