表达荧光素酶基因的重组PRRSV在指征病毒增殖中的应用

摘要

猪繁殖与呼吸综合征病毒(PRRSV)是引起猪繁殖与呼吸综合征的致病病原,目前PRRS已成为危害世界养猪业的重要疫病之一.本研究基于高致病性PRRSV细胞致弱株HuN4-F112的反向遗传操作平台,运用SOE PCR技术,将萤火虫荧光素酶基因插入其基因组ORF1b和ORF2之间,并在ORF2前,荧光素酶基因后插入一个TRS6cassette,构建成功重组质粒pA-Fluc,对其进行病毒拯救获得重组病毒vA-Fluc.对vA-Fluc进行病毒生物学特性分析,遗传稳定性分析,结果发现表达萤火虫荧光素酶基园的重组PRRSV,vA-Fluc与亲本病毒vHuN4-F112在病毒N蛋白表达、细胞病变(CPE)情况、病毒多步生长曲线、空斑形态等生物学特性方面无显著差异。

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