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基于双荧光素酶报告基因的环境致癌物DNA损伤与修复检测系统的建立与应用

摘要

目的:建立一种能够对环境致癌物DNA损伤和修复作用同时进行快速检测的系统.方法:CdCl2体外受损质粒pTK-RL,转染到HepG2细胞中,建立可检测DNA修复能力的检测系统;质粒pgadd153-1uc和体外受损的质粒PTK-RL共转染到HepG2细胞中,以不同致癌物或非致癌物刺激细胞,利用双荧光素酶检测方法同时检测DNA损伤和修复作用.结果:双荧光素酶报告基因检测系统均可阳性检出16种已知环境致癌物对DNA损伤与修复能力的影响,并与单独gadd153-LUC检测系统或者宿主细胞恢复活性实验的检测限值基本相同,3种无遗传毒性的化学物质,均未见DNA损伤作用和对DNA修复能力的影响;同时检测三个不同污染区土壤中非挥发性有机提取物,均可诱导DNA损伤和抑制DNA修复能力,强度为居民区>垃圾焚烧厂>农田土壤.结论:本研究建立了可同时检测环境致癌物DNA损伤与修复能力的双荧光素酶报告基因检测系统.

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