首页> 中文会议>中国畜牧兽医学会兽医产科学分会第十三次学术研讨会 >可控表达MSTN shRNA转基因小鼠的制备及其对发育的影响

可控表达MSTN shRNA转基因小鼠的制备及其对发育的影响

摘要

MSTN是肌肉生长发育的一个重要的负调控因子,已有研究发现MSTN基因持续低表达或者敲除后在提高肌肉量的同时也和难产率、流产率及胎儿死亡率高有很高的关联性.本研究中,设计了一对小鼠MSTN shRNA,验证其效率后,构建了整合型四环素诱导表达载体pSingle-tTS-MSTNshRNA,细胞水平验证其诱导活性剂表达活性后,利用显微注射法制备一批转基因小鼠.分子生物学检测结果表明,和正常小鼠组及未经诱导组相比,转基因小鼠MSTNshRNA诱导表达后,P21表达显著上调(1±0.06&0.85±0.09&0.57±0.25),CDK2表达显著降低(1±0.24&0.73±0.19&1.3 7±0.37),同时下调成肌分化因子MyoD的表达(1±0.14&0.73±0.23&1.37±0.24),说明转基因小鼠骨骼肌细胞的增殖和分化受到明显的调控。本研究说明了成功制备了MSTN shRNA可控表达转基因小鼠,证明了MSTN表达在出生后调控可以实现肌肉量增加的同时不会对转基因小鼠自身有不良影响。为将可控表达的MSTN基因应用到基因工程育种、药物治疗肌肉萎缩病等方面奠定技术基础。

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