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水貂阿留申病毒、肠炎病毒与犬瘟热病毒多重PCR检测方法的建立与应用

摘要

目的:水貂阿留申病、病毒性肠炎与犬瘟热并称影响水貂健康的三大疫病,拟建立一种可同时检测三种病毒的多重PCR检测方法. 方法:针对三种病毒基因保守区分别设计了3对特异性引物,对貂阿留申病毒(ADV)和水貂肠炎病毒(MEV)的DNA模板和犬瘟热病毒(CDV)的RNA模板进行了多重PCR扩增和扩增条件优化. 结果:PCR可同时扩增出601bp(ADV)、205bp(MEV)和451bp(CDV)的特异性目的条带,敏感性试验表明最低核酸检出量为ADV2.67×104拷贝·μL-1、MEV3.02×104拷贝·μL-1和CDV1.72×105拷贝·μL-1.临床样品检测结果表明多重PCR和单一PCR检测结果一致. 结论:建立的多重PCR检测方法可快速地检测ADV、MEV和CDV单一或混合感染的临床样品.

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